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抗噬菌体菌株的筛选方法

时间:2024-11-07 19:38:01

1、首先,是固体法将生长成熟的敏感菌斜面,环刮下斜面上的菌体。将此菌液倒人灭菌荡3min,然后过滤制成菌悬液,控制其浓度为10的装有玻璃珠的三角瓶中,在摇床上振,加人10ml 灭菌生理盐水,用接种个/ml。取此菌悬液0.1ml和菌体液0.1mI(浓度107 个/ml以上),同时加到牛肉膏蛋白胨平板上,使敏感菌浓度与噬菌体浓度比达1: 100 以上。

抗噬菌体菌株的筛选方法

3、然后,是液体法,将敏感菌悬液1mI(浓度为10 个/ml)和噬菌体液1ml(浓度107 个/ml以上)同时接种到牛肉膏蛋白胨培养液中,培养24 h后加入Iml浓度为10 个/ml的噬菌体液再继续培养。当培养液变清又重新变浑独后,再加噬菌体反复感染,培养一定时间后进行平皿分离,从中筛选出抗性菌株保藏备用。

抗噬菌体菌株的筛选方法

5、然后,摇瓶发酵复筛,将用上述方法初步确定具有抗性的菌株接种到含有噬菌体液0.1ml(浓度为107 个/m)的摇瓶中发酵培养数天,测定其生物效价,同时接敏感菌对照摇瓶(加和不加噬菌体)。

抗噬菌体菌株的筛选方法
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