1、 1-5 mL过夜培养的大肠杆菌菌液。1 min,12000 rpm离心,去除上清
2、加入250 μL悬浮液,重新悬浮细胞。
3、加入250 μL裂解液,上下轻轻颠倒,至液体变澄清,再加入10 μL碱性蛋白酶,混勻。静止1 min。
4、加入350 μL中和液,点到混勻,离心10 min 12000 rpm。
5、取上清转移到柱子里边,离心1 min 12000 rpm。
6、弃废液,加入750 μL洗涤液,离心1 min 12000 rpm。
7、弃废液加入250 μL洗涤液,重复(6)—次。
8、将柱子转移到新的离心管中,加入100μL左右PCR水中,静止5min。离心1m坡纠课柩in, 12000 rpm。保存于-20摄氏度。